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基因扩增仪与DNA复制的基本要素是一致的
发布时间:2022-08-26   点击次数:198次
   基因扩增仪是分子生物学研究重要的工具,是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术。该仪器是由外壳、变温反应腔、散热系统、加热系统、制冷系统、电子控制系统、供电系统、人机界面等各部分组成的,主要用于科研及临床的基因扩增、定性PCR基因扩增、荧光/酶免终点定量DNA基因扩增、基因芯片等其他基因分析应用的基因扩增等。
 
  基因扩增的原理是双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶的作用下,以单链为模版,根据碱基互补配对原则复制成新的单链,与模版配对成为双链分子挎贝。在体外实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。
 
  基因扩增的基本要素与DNA复制的基本要素是一致的。
 
  1、DNA模板:待拷贝的DNA称为模板,它可以是双链DNA也可是单链DNA,然后扩增得到的产物是双链状态的。
 
  2、引物:是DNA复制的先锋,就象结晶过程中的晶核,引导DNA的合成。在PCR扩增中一般使用合成的寡核苷酸作引物。
 
  3、DNA聚合酶(TaqDNA聚合酶):是DNA复制的动力,在dNTP等底物存在时在引物的引导下沿着模板DNA合成互补的DNA链。
 
  4、缓冲液:提供DNA合成反应所需的pH,离子强度等环境。
 
  5、4种单核苷酸:dNTP,提供DNA合成原料。
 
  它可以在试管里建立反应,经过数小时之后,就能将微量的目的基因或者某一特定的DNA片段扩增数十万倍,乃至千百万倍,而无需通过繁琐费时的基因克隆程序,便可获得足够数量的精确的DNA拷贝,所以有人亦称之为无细胞的分子克隆法。
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